Die Dissertation ist gesperrt bis zum 23. Juni 2024 !
Obwohl Infektionen mit dem Hepatitis C Virus (HCV) durch den Einsatz von direkt
wirkenden Virostatika (Direct Acting Antivirals; DAA) geheilt werden können, bleiben
Infektionen mit HCV und deren Folgen ein ernstes Gesundheitsproblem weltweit. Die Forschung hat viele Aspekte der HCV Biologie und seiner Interaktion mit dem Immunsystem erforscht, konnte jedoch bisher keinen schützenden Impfstoff entwickeln. Durch ein besseres Verständnis des Zusammenspiels zwischen Virus und Wirt erhofft man sich tiefgreifendere Erkenntnisse, die dazu beitragen können, das derzeitige Fehlen eines Impfstoffs, sowie künftige Probleme, die durch die Enstehung therapieresistenter Virusvarianten verursacht werden könnten, zu bewältigen.
In dieser Arbeit wurde die Tetraspanin Proteinfamilie im Zusammenhang mit der HCV Replikation untersucht. Ein auf Durchflusszytometrie basierendes Screening der Oberflächenexpression ergab, dass die Konzentrationen der Tetraspanine CD63 und CD81 in Zellen niedriger waren, die eine virale, genomische RNA exprimieren. CD81 ist als wichtiger Co-Rezeptor für den Eintritt von HCV in Zellen bereits gut charakterisiert.
Weitere Analysen wurden durchgeführt, um zu untersuchen, wie die Herabregulierung
von CD81 zustande kommt und um mögliche Funktionen aufzudecken. Es konnte gezeigt werden, dass die Herunterregulierung von CD81 in HCV-exprimierenden Zellen auf der Transkriptionsebene vermittelt wird. Um mögliche weitere Rollen von CD81 im Lebenszyklus von HCV zu untersuchen, wurden CD81 Knock-out Zellen generiert. Im Verlauf ihrer Charakterisierung wurde festgestellt, dass virale Konstrukte mit beeinträchtigter Replikationskinetik in frühen Stadien des viralen Lebenszyklus von der Anwesenheit von CD81 abhängig sind. Anschließend wurde gezeigt, dass das Fehlen von CD81 zu einer ausgeprägteren integrierten Stressantwort (Integrated Stress Response; ISR) und einer höheren NFκB-Aktivität führen kann. Dies führt zu der Hypothese, dass nach der anfänglichen Etablierung der Replikation, CD81 von HCV herunterreguliert wird, um von überlebensfördernden Signalen zu profitieren, die durch die ISR- und NFκB-Wege vermittelt werden.
Insgesamt konnte gezeigt werden, dass CD81 durch HCV in produktiv replizierenden Zellen herunterreguliert wird, vermutlich um überlebensfördernde Signale zu verstärken. Wenn dieser Mechanismus weiter erforscht wird, könnte er zum Verständnis beitragen wie HCV Infektionen chronisch werden und aufzeigen wo mögliche Ansatzpunkte für ein Eingreifen liegen.